Quimerismo

El análisis de Quimerismo permite hacer el seguimiento de la evolución de un trasplante alogénico de progenitores hematopoyéticos, ya sean de médula ósea, sangre o cordón umbilical. Es el método utilizado para hacer el seguimiento y evaluar el riesgo de recaída de un paciente trasplantado.

 

El análisis de Quimerismo se basa en la identificación de un polimorfismo informativo, es decir, de un marcador molecular que nos permita diferenciar las células del receptor (presencia de marcador) de las células del donante (ausencia del marcador).

Una vez seleccionado el polimorfismo informativo, se procede al seguimiento y cuantificación post-trasplante a distintos tiempos de este polimorfismo, de modo que cuando las células del receptor son detectadas podemos predecir que habrá una recaída de la enfermedad.

La técnica de estudio de Quimerismo basada en amplificación de Short Tandem Repeats (STR) y posterior análisis de fragmentos, presenta una limitación en cuanto a sensibilidad y requiere separación previa de linfocitos. Las tecnologías basadas en PCR Cuantitativa (qPCR) y PCR Digital aplicadas a estudios de Quimerismo ofrecen mejor sensibilidad y mayor precisión con el seguimiento de un único marcador.

El estudio de Quimerismo por qPCR, nos da una mayor sensibilidad que la STR sin necesidad de separación previa de linfocitos, el flujo de trabajo es más sencillo y ofrece resultados fiables. Es compatible con cualquier equipo qPCR con canales FAM y VIC.

El estudio de Quimerismo por PCR Digital ofrece una sensibilidad y precisión tan elevada que permite adelantar la detección de la recaída, lo que permite establecer acciones médicas con suficiente antelación con el consiguiente beneficio para el paciente. Es compatible con equipos de PCR Digital ThermoFisher y Biorad.

 

PRINCIPALES CARACTERÍSTICAS

  • Marcado CE-IVD.
  • Kits fabricados en España por la empresa IMEGEN, pionera y líder en el desarrollo de pruebas de genética y genómica.
  • Alta sensibilidad, no requiere separación previa de linfocitos.
  • Kits de screening por qPCR basados en la identificación de alelos de inserción/deleción (INDELs) tanto para seguimiento por qPCR como para seguimiento por PCR Digital.
  • Seguimiento de un único marcador.
  • Kits de seguimiento por qPCR o PCR Digital.
  • Flujo de trabajo rápido y sencillo.
  • Resultados validados y fiables.
  • Incluye software para generar base de datos, análisis, seguimiento, acciones médicas…
  • Soporte técnico y asesoramiento por profesionales especializados en oncohematología.

 

Documentación relacionada

Gamas

Quimerismo por qPCR

La PCR cuantitativa (qPCR) es capaz de amplificar y cuantificar simultáneamente el gen diana. Para ello emplea componentes similares a los de una PCR convencional, pero se incluyen unas sondas marcadas con fluoróforos (sondas TaqMan). Se trata de una técnica ampliamente VERSÁTIL, utilizada para muchas aplicaciones biomédicas, gracias a su sensibilidad y especificidad.

Una aplicación de esta tecnología es el estudio de Quimerismo por qPCR.

El kit de screening imegen-QScreening Multiplex I contiene la Master Mix liofilizada en 8 pocillos para el análisis de 16 polimorfismos de inserción/deleción (presencia/ausencia) en una PCR Múltiplex con marcaje FAM/VIC. Los INDELs seleccionados poseen un gran poder de discriminación y alcanzan una informatividad del 96%. Se requiere analizar una muestra del donante y otra del receptor pre-trasplante. Una vez detectado un polimorfismo informativo con QScreening Multiplex I, se recomienda adquirir el kit imegen-Quimera específico para el marcador informativo que permite el seguimiento por qPCR.

 

Cada kit imegen-Quimera qPCR contiene la Master Mix liofilizada para un polimorfismo específico (marcado con FAM) y un gen de referencia β-globina (marcado con VIC) que permitirá la cuantificación relativa del polimorfismo seleccionado respecto a la cantidad de DNA total presente en la muestra.

 

 

REFERENCIAS

Referencia Descripción Formato

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Master Mix General para qPCR

10 muestras

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Set imegen-Quimera Screening Multiplex I qPCR

10 muestras

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Set imegen-Quimera SRY qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera RhD qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-3I qPCR

25 reaccioness

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Set imegen-Quimera Q116-4I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-5I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-6I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-7I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-8I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-9I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-10I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-11I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-12I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-4D qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-5D qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-10D qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-23I qPCR

25 reaccioness

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Set imegen-Quimera Q116-20I qPCR

25 reacciones

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Set imegen-Quimera Q116-12D qPCR

25 reacciones

  • Sensibilidad 0,1 %
  • Kit de screening por qPCR, con informatividad del 96%.
  • Kit de seguimiento por qPCR.
  • Seguimiento de un único marcador.
  • Cuantificación relativa.
  • Compatible con cualquier equipo qPCR con canales FAM/VIC o HEX.
  • No requiere separación de linfocitos.
  • No requiere muestra pre-trasplante, ya que se suministra un plásmido sintético.
  • Técnica muy sensible, rápida (resultados en 3 horas) y de fácil interpretación.
  • Software para generar base de datos, análisis de resultados, seguimientos, control de acciones médicas… y plantilla de Excel para cuantificación descargable.
Quimerismo por PCR Digital

La PCR digital es una nueva técnica de detección y cuantificación de ácidos nucleicos. Permite la cuantificación absoluta, sin la necesidad de generar una curva estándar. Se basa en  la división de la muestra en miles de PCR individuales de modo que no es necesario comparar los resultados con muestras previas ni realizar réplicas y permite una cuantificación absoluta.

La principal ventaja de la PCR Digital, frente a qPCR y otras técnicas, es su PRECISIÓN debido a que la tasa de error asociada a la técnica de PCR Digital es del 5% frente al 25% de la qPCR. Esto implica que la PCR Digital es capaz de detectar cambios muy pequeños, que con la qPCR podrían pasar inadvertidos.

Quimerismo PCR

Una aplicación de la PCR Digital es el estudio del Quimerismo, ya que permite la cuantificación absoluta de cantidades muy pequeñas de DNA con gran precisión, por lo que permite adelantar la detección de la recaída en el tiempo y determinar las acciones médicas correspondientes con suficiente antelación, con el consiguiente beneficio para el paciente.

El kit de screening, imegen-Quimera Screening Multiplex Plus, contiene la Master Mix liofilizada en 8 pocillos para el análisis de 16 polimorfismos de inserción/deleción (presencia/ausencia) en una PCR Múltiplex con marcaje FAM/VIC. Para determinar presencia/ausencia no es necesario recurrir a la tecnología digital. Los INDELs seleccionados poseen un gran poder de discriminación y alcanzan una informatividad del 99%. Se requiere analizar una muestra del donante y otra del receptor pre-trasplante.

Si el kit imegen-Quimera Screening Multiplex Plus no identificase ningún marcador informativo, entonces se recomendaría el uso del kit imegen-Quimera Screening Multiplex Plus II, el cual ofrece 16 nuevos polimorfismos seleccionados para ofrecer una informatividad del 99%. Una vez seleccionado un polimorfismo informativo, se recomienda adquirir el kit imegen-Quimera específico para el marcador informativo que permite el seguimiento por PCR Digital.

 

Disponibles en dos formatos:

El formato LIQUID es compatible con el equipo QuantStudio 3D Digital PCR System (Thermo FisherScientific). El kit contiene los oligonucleótidos de amplificación y las sondas: una marcada con VIC  para la β-globina (gen de referencia) y otra con FAM para un polimorfismo específico. Además se suministra el fluido de inmersión (jeringa y punta de plástico), 12 Chips 20K (base y tapa) y el dispositivo de carga de muestras.

 

El formato DRY es compatible tanto con el equipo QX200 Droplet Digital PCR System (Bio Rad) como con el QuantStudio 3D Digital PCR System (Thermo FisherScientific). El kit contiene liofilizados los oligonucleótidos de amplificación y las sondas: una marcada con VIC  para la β-globina (gen de referencia) y otra con FAM para el polimorfismo específico.

 

REFERENCIAS

Referencia Descripción Formato

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Set imegen-Quimera Screening Multiplex Plus qPCR

10 muestras

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Set imegen-Quimera Screening Multiplex Plus II qPCR

10 muestras

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Master Mix General para qPCR

10 muestras

IMG-116-27 DRY

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Set imegen-Quimera SRY qPCR

12 muestras

IMG-116-28 DRY

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Set imegen-Quimera RhD dPCR

12 muestras

IMG-116-32 DRY

IMG-116-32

Set imegen-Quimera Q116-6I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-3I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-7I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-12D dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-11I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-5I dPCR

12 muestras

IMG-116-30 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-4I dPCR

12 muestras

IMG-116-35 DRY

IMG-116-35

Set imegen-Quimera Q116-10I dPCR

12 muestras

IMG-116-37 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-23I dPCR

12 muestras

IMG-116-42 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-28I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-32I dPCR

12 muestras

IMG-116-45 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-31I dPCR

12 muestras

IMG-116-44 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-30D dPCR

12 muestras

IMG-116-43 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-29D dPCR

12 muestras

IMG-116-41 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-27D dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-24I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-33I dPCR

 

12 muestras

IMG-116-49 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-37I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-38I dPCR

12 muestras

IMG-116-55 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-44I dPCR

12 muestras

IMG-116-54 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-43I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-49I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-39I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-50I dPCR

12 muestras

IMG-116-48 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-9I dPCR

12 muestras

IMG-116-56 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-45I dPCR

12 muestras

IMG-116-40 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-20I dPCR

12 muestras

IMG-116-52 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-41I dPCR

12 muestras

IMG-116-60 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-46I dPCR

12 muestras

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Set imegen-Quimera Q116-47I dPCR

12 muestras

IMG-116-53 DRY

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Set imegen-Quimera Q116-42I dPCR

12 muestras

 

 

  • Marcado CE-IVD.
  • Sensibilidad 0,05%
  • Kit screening por qPCR, con informatividad del 99%. Compatible con equipos qPCR con canales FAM/VIC o HEX.
  • Seguimiento de un único marcador.
  • Kit cuantificación por PCR Digital. Compatible con equipos QuantStudio 3D Digital PCR System (Thermo FisherScientific) y QX200 Droplet Digital PCR System (Bio Rad).
  • Todos los marcadores utilizan las mismas condiciones de PCR, por lo que pueden combinarse y analizarse a la vez en un mismo run.

 

  • MÁXIMA PRECICIÓN Y CUANTIFICACIÓN ABSOLUTA, que implica un aumento de la sensibilidad y una DETECCIÓN TEMPRANA DE LA RECAÍDA.
  • No requiere muestra previa del paciente.
  • No requiere réplicas (un chip – una muestra).
  • No requiere de curva estándar.
  • No requiere separación de linfocitos.
  • Screening por qPCR, ahorro costes y mayor disponibilidad de equipos.
  • Flujo de trabajo rápido y sencillo y de fácil interpretación.
  • Software para generar base de datos, análisis de resultados, seguimientos, control de acciones médicas…

 

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