Ingeny
Internacional es una compañía Holandesa que se ha dedicado
en los últimos años al estudio de equipamiento, técnicas
y reactivos que mejoren el rendimiento en estudio de mutaciones y
polimorfismos en el DNA. |
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EQUIPAMIENTO
El sistema de Ingeny se basa en un sistema de
electroforesis vertical con un espaciador forma U diseño propiedad
de Ingeny. La característica principal del mismo es que permite
cargar el gel con un 100% de ausencia de fugas directamente en el
equipo. Por otra parte el equipo se suministra con un sistema termostatizado
de buffer. Esto se traduce en un sistema de análisis de DNA
optimo. |
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TÉCNICAS
Ingeny basa principalmente su tecnología
en DGGE ( electroforesis en geles de gradiente desnaturalizante) Sin
embargo otras poderosas técnicas pueden aplicarse.
• CDGE (Electroforesis de Gel Desnaturalizante
Constante)
• TGGE (Electroforesis de Gel Gradiente
de Temperatura)
• SSCP (Polimorfismo de Conformación
de cadena sencilla)
• HA (Análisis Heterodúplex)
• PTT ( Prueba de Proteína
truncada) |
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TECNOLOGÍA
DGGE
Esta técnica se basa en la separación de la doble cadena
de DNA. La temperatura a la cual 2 cadenas se separan depende de la
composición de los pares de bases del fragmento. Una única
variación de un par de bases podría modificar esa temperatura.
Por este camino, si nosotros unimos, una cola de G-C al primer de
amplificación, el fragmento que se produce se podría
separar parcialmente al correrse en un gel de gradiente desnaturalizante.
De forma que la migración de estos fragmento podría
ocurrir en diferentes posiciones del gel, cuando uno o más
pares de bases son diferentes o no están. La separación
de la doble cadena se puede basar en la temperatura o de forma química.
Un gradiente de urea y formamida combinada con una temperatura de
60º podría tener el mismo efecto que trabajar a una mayor
temperatura sin presencia de urea- formamida. |
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Aplicaciones utilizando DGGE
Se ha utilizado DGGE para encontrar mutaciones en muchos genes. EL
método también puede utilizarse para encontrar mutaciones
en genes mitocondriales.
• Detección de mutación
en genes humanos.
•
Determinación de biodiversidad en muestras bacterianas de suelo,
agua normal o agua salada.
•
Determinación de biodiversidad en poblaciones bacterianas intestinales.
•
Identificación de DNA mitocondrial en aplicaciones forenses.
•
Determinación de la cantidad de variación en genes HLA
en el tipaje de tejidos.
•
Descubrimiento de diferencias entre los genomas de cepas vírales.
•
Valoración de origen en plantas.
•
DGGE RAPD para encontrar polimorfismos en genomas de plantas.
Siguen
surgiendo nuevos campos de aplicación
Sondas preparadas para técnica DGGE
Tan importante como un perfecto diseño del equipo son los
primers.
Ingeny posee un software especifico para poder diseñar los
primers para la técnica de DGGE. Gracias a este software
los fragmentos para la detección de mutaciones o variaciones
se pueden diseñar de la forma mas especifica para obtener
los mejores resultados.
Ingeny puede dar soporte a los usuarios para el diseño de
primers para técnicas especificas de un usuario.
Por otro lado y en el campo de la clínica, posee una serie
de kits para el estudio de las siguientes enfermedades:
• CFTR
•
HNPCC
MLH1
MLH2
MSH6
•
BRCA
BRCA1
BRCA2
•
TP53
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Nuevos
kits salen al mercado continuamente.
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