TÉCNICA DE ELISA. LAT™

En este importante ámbito dentro de la Histocompatibilidad, One Lambda ha sacado al mercado dos nuevas técnicas junto a la tradicional de citotoxicidad: ELISA y Citometría de flujo. Estas representan un paso adelante en la detección de anticuerpos HLA.
Sus principales ámbitos de aplicación se encuentran en la monitorización de los pacientes pretransplantados y posttransplantados de órganos sólidos.


Se pueden mencionar como principales beneficios de estas nuevas técnicas los siguientes:
• Mayor sensibilidad
• Mayor especificidad
• Detección de anticuerpos HLA no fijadores de complemento
• Sin interferencias por autoanticuerpos
• Detección de anticuerpos Clase I y II por separado
• Diferencia las reacciones debidas a anticuerpos IgG de las debidas a IgM
• Antígenos HLA purificados
• Ahorro de tiempo del personal
• Homogeneidad del panel antigénico a lo largo del tiempo

Esta gama de reactivos se basan en la determinación de anticuerpos HLA mediante técnica ELISA.

Los antígenos HLA purificados son fijados directamente en el fondo de los pocillos de la placa Terasaki. Al trabajar con antígenos purificados se consigue que la reacción sea más específica y se eviten falsas reacciones positivas o negativas. Su nivel de sensibilidad es similar a la técnica CDC-AHG y superior a la CDC.

Desaparece el problema de la viabilidad celular.

Se conserva a 2-5°C y su envío se realiza a temperatura ambiente.

El kit viene con un anticuerpo IgG pues es una opinión generalizada que únicamente los anticuerpos IgG tienen relevancia en transplantes. Caso que se desee detectar anticuerpos IgM disponemos del correspondiente anticuerpo.
Existen tres tipos de kits diferentes:

LAT™ Mix
Se utiliza para determinar la presencia o no de anticuerpos en la muestra.
Consiste en un "pool" de antígenos, incluyendo especificidades raras. Se establece la positividad o negatividad de la muestra. Los antígenos de Clase I y II se encuentran separados. Es muy adecuado para el screening de las listas de espera renales por su rapidez y economía, permitiendo manejar un número elevado de muestras simultáneamente. Para su lectura se utiliza un substrato que desarrolla un color azul, visible para el ojo humano.

Kits disponibles:

Referencia Descripción
LATM 20x5
 Clase I y II. 20 tests/placa
LATM10x5
 Clase I y II. 10 tests/placa
LATM120 Clase I. 20 tests/placa
LATM220 Clase II. 20 tests/placa
 
LAT™
Se utiliza cuando el laboratorio pretende conocer el PRA y/o las especificidades de los anticuerpos HLA presentes en la muestra.
Los antígenos purificados se fijan en los pocillos de una placa Terasaki. Sus especificidades han sido convenientemente seleccionadas para conseguir una adecuada representatividad. En cada pocillo se fijan antígenos diferentes, como si de un panel de células se tratase.

Los kits disponibles actualmente son los siguientes: 
Referencia Descripción
LAT1-40
 Clase I. 42 líneas celulares
LAT2-40
 Clase II. 32 líneas celulares
LAT12-40 Clase I y II. 40 líneas celulares
LAT12-88 Clase I y II. 88 líneas celulares
 
LAT™ Single Antigen
En la actualidad, las técnicas empleadas en la detección de anticuerpos anti-HLA no permiten su adecuada identificación y asignación en sueros hiperinmunizados, dificultando la realización del transplante. Dicha situación se produce especialmente en los casos de la presencia de los anticuerpos más frecuentes, como es el caso del A2, y/o de anticuerpos pertenecientes a grupos CREG importantes. Se produce un enmascaramiento de unas especificidades con otras.

One Lambda ha sacado el LAT Single Antigen para dar mayores posibilidades de transplantar a los pacientes hiperinmunizados. Los antígenos de HLA se fijan de manera individualizada en el fondo de los pocillos.

Por lo demás, su procesamiento es idéntico al resto de productos de la línea ELISA.

Kits disponibles:  
Referencia Descripción
LAT1HD
 Clase I. 96 pocillos

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