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 Técnica de citometría de flujo FlowPRA®





Su tecnología es la fijación de antígenos HLA en beads que son analizados en los más comunes citómetros de flujo.

Estos antígenos son purificados. No se producen reacciones falsas positivas por otros anticuerpos no-HLA.

Esta técnica es la más sensible de las existentes y, al igual que en el caso del ELISA, al trabajar con antígenos purificados se eliminan reacciones


extrañas como puede ser en el caso de autoanticuerpos. Del mismo modo, se detectan los anticuerpos HLA no fijadores de complemento.
Se eliminan, al mismo tiempo, los problemas de viabilidad que es un inconveniente cuando se trabaja con paneles celulares.

Los kits detectan los anticuerpos IgG. Opcionalmente se puede hacer uso de un conjugado IgM.





Tabla de contenidos
FlowPRA® Screening
FlowPRA™ específico
FlowPRA™ Single Antigen       
ADSORB OUT™



FlowPRA® Screening

Pool de 30 beadspara clase I y clase II. Determinan la existencia o no de anticuerpos y % PRA.
Estos antígenos proceden de 30 líneas celulares y son purificados.

Referencia Descripción
FLI-30 Clase I. %PRA
FL2-30 Clase II. %PRA

Estos dos productos se pueden combinar para un análisis simultáneo de la Clase I y II.

 

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FlowPRA™ específico
Cuando lo que se va buscando es identificar las especificidades de los anticuerpos, además del % PRA, se debe utilizar FlowPRA™ específico.

Dependiendo de las necesidades del laboratorio se puede optar por alguno de los siguientes productos:

• FL1SP: Panel de 32 beads de clase I. Estas se reparten en 4 grupos de 8 que se pasan por el citómetro de manera separada.

• FL2SP:Panel de 32 beads de clase II. Estos se reparte en 4 grupos de 8 que se pasan por el citómetro de forma separada.


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Los beads de control tienen por finalidad determinar el "background" de la muestra cuando se trabaja con el FlowPRA™ específico o FlowPRA™ screening. Su proceso de fabricación es idéntico a los anteriores, con la salvedad de que no se fijan antígenos en su superficie. Emiten en un único espectro lo que permite que puedan distinguirse del resto de beads y por tanto ser mezclados.

Para realizar la calibración del citómetro donde se van a analizar las muestras es absolutamente recomendable pasar un suero positivo (FL1-PC, FL2-PC) y un suero negativo (FL-NC). En el caso de trabajar con el FlowPRA específico deben pasarse por cada uno de los grupos de que se compone el kit.




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FlowPRA™ Single Antigen
Se utiliza tecnología recombinante para la obtención de los antígenos.

• FL1HD: Se compone de 32 beads de clase I agrupados en 4 grupos de 8.

• Del FL1HD05 al FL1HD10: Son grupos suplementarios para ampliar el panel de antígenos del FL1HD.

• FL2HD: Tiene el mismo formato que el FL1HD pero con antígenos de clase II.



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ADSORB OUT™
El propósito de este reactivo de One Lambda es reducir el alto "background" que en determinadas muestras se produce por uniones inespecíficas de componentes presentes en el suero humano a los beads que se utilizan en el análisis de anticuerpos HLA por citometría de flujo.

Puede utilizarse cuando a la muestra se le va estudiar los anticuerpos mediante cualquiera de los productos FlowPRA® o LABScreen® de One Lambda. El Adsorb Out™ no está pensado para su utilización con LAT™.

En algunos casos, dependiendo del material causante del alto "background", puede no ser totalmente eficaz.


Referencia Descripción
ADSORB 50 µl (25 tests)





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